近日,由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所白昌明等研究發(fā)明的“一種牡蠣皰疹病毒的間接原位雜交PCR檢測(cè)方法”獲國(guó)家發(fā)明專利授權(quán),專利號(hào):ZL 2018106023857。
本發(fā)明是一種牡蠣皰疹病毒的間接原位雜交PCR檢測(cè)方法,屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域,包括如下步驟:首先將待檢測(cè)樣品固定,脫水,包埋制備成組織切片,并配制液相PCR反應(yīng)體系,通過(guò)PCR反應(yīng)程序,對(duì)組織切片中原位固定的靶DNA進(jìn)行擴(kuò)增,再將特異性探針與擴(kuò)增后的組織切片進(jìn)行原位雜交,最后通過(guò)免疫酶標(biāo)技術(shù)在顯微鏡下對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷,如果出現(xiàn)藍(lán)紫色陽(yáng)性信號(hào),則表示該樣品的牡蠣皰疹病毒檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,并可對(duì)病毒做到精確定位。本發(fā)明結(jié)合普通液相PCR方法靈敏度高和原位雜交方法可以實(shí)現(xiàn)組織定位的優(yōu)點(diǎn),從而達(dá)到對(duì)牡蠣皰疹病毒的靈敏、特異檢測(cè)和精確定位。該檢測(cè)方法可用于貝類各時(shí)期養(yǎng)殖過(guò)程中的牡蠣皰疹病毒的跟蹤檢測(cè),具有很高的使用價(jià)值。