近日,由黑龍江所徐黎明等人完成的“一種鯉冠狀病毒TaqMan實時熒光定量RT-PCR檢測引物及應(yīng)用”獲國家發(fā)明專利授權(quán),授權(quán)專利號:ZL202010002911.3。
本發(fā)明屬于病毒分子檢測技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種鯉冠狀病毒TaqMan實時熒光定量RT-PCR檢測引物及應(yīng)用。發(fā)明人首次從鯉魚中分離出了一種鯉冠狀病毒(Cyprinid Nidovirus)HL39(保藏編號為CCTCC NO:V201988),針對該病毒序列設(shè)計引物和探針:正向引物F:5'-TTGCGACCCAAAGACGGTTATT-3',反向引物R:5'-CGGTGGTTGAGAGCTTGTAG-3';熒光探針為P:5'-FAM-ACCTCTTACACTCTGCCCCTTTACCT-TAMRA-3'。利用該引物制備的試劑盒,靈敏度高,在50-5×109拷貝數(shù)范圍內(nèi)定量準(zhǔn)確;檢測速度快,僅1小時,加上RNA提取及逆轉(zhuǎn)錄制備,共僅需3-4小時,可同時進行高通量的樣品檢測。